lamp:环介导等温扩增法的特征是针对目标dna链上的六个区段设计四个不同的引物然后再利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型dna合成酶、基质等共同置于一定温度下(60~65℃)、经一个步骤即可完成。
rpa:主要依赖于三种酶:能结合单链---(寡核苷酸引物)的重组酶、单链dna结合蛋白(ssb)和链置换dna聚合酶。
重组酶与引物结合形成的蛋白-dna复合物,能在双链dna中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动dna合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的dna链与ssb结合,防止进一步替换。在这个体系中,pcrd3kit---试纸条,由两个相对的引物起始一个合成事件。
raa技术 是重组酶介导等温---扩增技术(recombinase aided amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、dna聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行---扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链dna,进口pcrd3kit---试纸条,在与引物同源的序列处使双链dna解旋,单链结合蛋白(ssb)防止单链dna复性,在能量和dntp存在的情况下,由dna聚合酶完成链的延伸,5-20分钟就可实现仪器扩增。
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