lamp:环介导等温扩增法的特征是针对目标dna链上的六个区段设计四个不同的引物然后再利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型dna合成酶、基质等共同置于一定温度下(60~65℃)、经一个步骤即可完成。
rpa:主要依赖于三种酶:能结合单链---(寡核苷酸引物)的重组酶、单链dna结合蛋白(ssb)和链置换dna聚合酶。
重组酶与引物结合形成的蛋白-dna复合物,能在双链dna中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应形成并启动dna合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的dna链与ssb结合,防止进一步替换。在这个体系中,由两个相对的引物起始一个合成事件。
自 1983 年出现---聚合酶链反应 (pcr) 方法以来,---扩增已渗透到生命科学的各个领域。 然而,尽管具有基本的影响,但 pcr 已被---在实验室的范围内,因为它需要一套复杂的热循环系统,其---了在资源匮乏环境中的外部应用。新的等温扩增策略正在寻求通过在恒温下提供---来突破传统的实验室---。在这些方法中,重组酶聚合酶扩增 (rpa) 是发展快的方法之一,尽管它的开始相对较晚,但是却经历了快速的普及和市场化。
我们通过对已发表文献的数据挖掘总结了关键的 rpa 实验技巧和问题,横向流动试纸条,以帮助研究人员掌握 rpa 反应。我们还概述了 rpa 发展的有影响力的---,并总结了对未来发展的展望以及对超过pcr和进一步---生命科学的影响。
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