立博泰业-基础型wle8202kit试剂盒

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    2022-5-31

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恒温扩增试剂盒有哪些常用酶

tma相关酶

依赖转录介导扩增(transc ription mediated amplification, tma)的扩增模板为rna或单链dna,检测的扩增产物为rna,详细原理可参考转录介导的---扩增技术小结。该体系所用酶有两种:m-mlv逆转录酶:用于模板rna逆转录成dna,并在逆转录过程中通过引物引入转录启动子序列,用于后续转录过程;t7 rna聚合酶:以逆转录形成的dna为模板,转录合成检测产物rna。



恒温扩增试剂盒

本试剂盒可以用于rt-lamp等温扩增,rt-lamp即逆转录和loop-mediated isothermal amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增rna。lamp是2000年才出现的一种新颖的等温---扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的dna聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特---和检测范围等指标上能---甚至优于rt-pcr技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,基础型wle8202kit试剂盒,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、---、---等病原体的快速检测。




恒温快速扩增试剂盒常用酶原料

尿dna糖基化酶尿dna糖基化酶(udg酶)又称尿-n-糖基化酶(ung酶),基础型wle8202kit试剂盒报价,可水解含尿的单链和双链dna释放出游离尿,而对rna无活性,与dutp搭配使用,可建立成pcr防污染体系。其原理如下:在pcr体系---dttp部分或全部替换为dutp后,基础型wle8202kit试剂盒公司,使得反应生成含有du碱基的扩增产物,这些扩增产物不同于天然模板,在进入含有udg酶的反应体系时,可被udg酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的n-糖基键,而经切割后的dna链在碱性或高温条件下易于断裂降解,从而失去被当作模板再扩增的能力,因此可防止扩增子污染(如下图)。市面上的udg酶主要有普通型和热敏型,其中热敏型udg酶在室温条件下即可催化反应,50℃以上加热可使其灭活,防止其降解后续pcr形成的含du扩增产物。虽然udg/dutp体系具有防污染功能,但在实际测试中还得---pcr的效率和灵敏度。一方面需---pcr扩增产物掺入足够量的尿碱基,从而可被udg有效切割;另一方面也需要---反应体系添加的dutp不会明显影响pcr效率,因此dttp和dutp的佳比例需通过优化确定。



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