进口液态basic试剂盒-立博泰业科技

rpa与lamp对比

lamp:环介导等温扩增法的特征是针对目标dna链上的六个区段设计四个不同的引物然后再利用链置换反应在一定温度下进行反应。反应只需要把基因模板、引物、链置换型dna合成酶、基质等共同置于一定温度下(60～65℃)、经一个步骤即可完成。

rpa：主要依赖于三种酶：能结合单链---(寡核苷酸引物)的重组酶、单链dna结合蛋白(ssb)和链置换dna聚合酶。

重组酶与引物结合形成的蛋白-dna复合物，液态basic试剂盒，能在双链dna中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动dna合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的dna链与ssb结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。

twistdx相关问题

1. rpa能实现多重化吗?

可以。rpa技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过，多重化的引物组合需要---设计，以便每个引物都能同样有效的工作。需要注意的是，rpa反应的引物总量(nmol)尽量不要超标太多。如果在-一个反应中使用两个以上的扩增引物，就应该控制不同引物的量。另外，我们应当事先考虑好检测多个扩增事件的探针、设备以及荧光团的兼容性。

2.能否对模板进行定量?

可以。扩增子达到可检出水平的时间，依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多，扩增子就越快达到可检出水平。不过，这种定量需要精心的实验安排，进口液态basic试剂盒，---对照反应是同时开始的。举例来说，可以利用镁离子的添---间进行控制。因为镁离子一一旦进入体系，rpa反应就会开始。此外，较慢的扩增过程有助于更的定量。我们可以通过调整反应条件或引物设计来减慢rpa的反应速度。

3能否进行荧光终点分析?

可以。这样比较的是反应开始时的荧光和反应结束时的荧光，荧光增强意味着发生了扩增。

4能否支持生物素或荧光标记的寡核苷酸?

支持。在rpa反应中，连有生物素或荧光团的引物与未修饰的引物表现差不多。据悉还没有发现任何差异。

5跑胶前需要回收rpa产物吗?

需要。rpa反应中的物质会干扰琼脂糖电泳，如果不进行产物回收，跑出来的带会出现拖尾。