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pcr---技术-英国twistdx inc公司开发恒温扩增rpa

英国twistdx inc公司开发的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，rpa)--被称为是可以替代pcr的---技术，目前新的等温扩增检测技术。以此为基础的twistamp? ---扩增产品，能够在15分钟内进行常温下的单分子---。该技术对硬件设备的要求很低，---适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物防御和农业等领域。

常规pcr必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而pcr仪本质上就是一个控制温度升降的设备。rpa反应的适宜温度在37°c - 42°c之间，无需变性，在常温下即可进行。这无疑能---加快pcr的速度。此外，由于不需要温控设备，rpa可以真正实现便携式的快速---。

据介绍，rpa检测的灵敏度---，能够将痕量的---(尤其是dna)模板扩增到可以检出的水平，从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且rpa还用不着复杂的样品处理，适用于无法提取---的实地检测。

rpa不仅可以对扩增产物进行终点检测，还可以对扩增过程进行实时监控，甚至可以通过试纸条(侧流层析试纸条lfd)读取结果。

目前，twistamp? 试剂盒的扩增子长度在500bp以内。不过，经过---优化的rpa扩增，进口tanfo02kit，也可以生成更长的扩增产物，或者减慢扩增速度(便于定量)，甚至在---的温度下进行反应。

twistdx试剂盒

我国主要的几种检测试剂盒都是基于rt-pcr原理。因为需要检测的---样本浓度有高有低，高的容易检测，低浓度就会漏掉。所以pcr的方法就把---基因扩增很多倍，达到可以检测出来的浓度。基本操作如下：

01  收集---等---样本，通过试剂打碎保护---的蛋白质壳子，tanfo02kit，萃取---rna。一方面是萃取，进口tanfo02kit，另一反面，打碎之后就没有了性，相对安全一些。

02  由于这次---是单链rna---，所以要先转换成cdna。这个可以类比像是视频文件，mp4，rmvb，avi这些都是常见格式，同一个视频不同格式，意思都一样，可以互相转换。

03  常规pcr反应，加热到94℃把dna拉链拉开，之后再55℃-60℃让引物，就是拉链扣分别套在两条拉链上，再升温到72℃让拉链自己，用左拉链做模板造一个右拉链，用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环，rna数量---。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的---这个时候也显现出来了。