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逆转录酶逆转录酶又称反转录酶，是一种rna介导的dna聚合酶，其反应过程中体现出三种功能为：以rna作为模板合成互补dna链 (complementary dna， cdna)，形成rna:cdna杂交链；发挥rnase h活性，降解rna:dna杂交链中的rna模板；以cdna作为模板合成第二链dna，形成双链dna（如下图）。其中，rnaseh活性是逆转录酶的一个内在特性，可在合成过程中同时切割rna:cdna杂合链中的rna模板，该特性可能降低逆转录效率，因此在实际应用中，常采用人工改造后的低或无rnase h活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有amv和m-mlv，amv分离自禽类成髓细胞瘤---(avian myeloblastosis virus， amv)，m-mlv逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠---(moloney murine leukemia virus， mmlv)，前者热稳定性优于后者，但amv逆转录酶的rnaseh活性也---，不利于长片段cdna合成。市面上多使用经基因工程改造过的m-mlv逆转录酶，其热稳定性改进，可在50℃左右工作，荧光型wlb8201kit试剂盒，同时rnase h活性进一步减弱，提高了其逆转录效率。

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重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification， rpa)是一种多酶协作的反应体系，详细原理可参考充满---力的恒温扩增技术:rpa、rca、sda、hda。该体系反应酶包含三种：重组酶：可与引物结合形成复合体，定位至与引物同源的靶序列，促使引物与模板结合，同时帮助dna解链，以便启动扩增；单链dna结合蛋白：可与被置换出的dna单链结合，稳定单链结构；dna聚合酶：如bsu dna聚合酶，用于dna链合成，同时具有链置换功能。对于rna模板，需在反应中加入逆转录酶形成rt-rpa体系；若利用标记探针进行检测，还需加入---酶对探针序列进行切割，常用---酶有---内切酶 iv(endonuclease iv， nfo)和---外切酶 iii(exonuclease iii， exo)，或者可与crisps/cas系统搭配使用。