near相关酶
切口酶扩增反应(nicking enzyme amplification reaction, near)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法,详细原理可参考啥---可10分钟完成---分子检测?。其使用的酶有两种:切刻内切酶:如nt.bstnbi切刻内切酶,该类酶不同于常规---性内切酶,其识别特定序列后仅在dna其中一条链上切割形成缺口,并暴露出游离的3’端;dna聚合酶:如vent (exo-) dna聚合酶或bst dna聚合酶,用于dna链合成,试纸条型恒温扩增试剂盒多少钱,同时具有链置换功能。
荧光探针设计:
在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;
探针序列不与特---引物识别位点重叠,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。
试剂盒储存:
运输条件:低温运输;
储存条件:储存温度≤-20°c ,dna型恒温扩增试剂盒多少钱,避光保存,避免重压、反复冻融:
产品有效期: 12个月。
逆转录酶逆转录酶又称反转录酶,是一种rna介导的dna聚合酶,其反应过程中体现出三种功能为:以rna作为模板合成互补dna链 (complementary dna, cdna),形成rna:cdna杂交链;发挥rnase h活性,胶体金试纸条型恒温扩增试剂盒多少钱,降解rna:dna杂交链中的rna模板;以cdna作为模板合成第二链dna,形成双链dna(如下图)。其中,rnaseh活性是逆转录酶的一个内在特性,可在合成过程中同时切割rna:cdna杂合链中的rna模板,恒温扩增试剂盒多少钱,该特性可能降低逆转录效率,因此在实际应用中,常采用人工改造后的低或无rnase h活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有amv和m-mlv,amv分离自禽类成髓细胞瘤---(avian myeloblastosis virus, amv),m-mlv逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠---(moloney murine leukemia virus, mmlv),前者热稳定性优于后者,但amv逆转录酶的rnaseh活性也---,不利于长片段cdna合成。市面上多使用经基因工程改造过的m-mlv逆转录酶,其热稳定性改进,可在50℃左右工作,同时rnase h活性进一步减弱,提高了其逆转录效率。
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