恒温快速扩增试剂盒应在怎样的温度下使用？

标准的era扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响，因为酶会逐渐地失去全部活性。对于rt试剂盒，我们建议客户在40℃下运行反应，因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。

立博泰业——多年销售恒温快速扩增试剂盒，我们公司坚持用户为---，想用户之所想，急用户之所急，以诚为本，讲求信誉，以产品求发展，以求生存，我们热诚地欢迎各位同仁合作共创。

恒温扩增试剂盒

本试剂盒可以用于rt-lamp等温扩增,rt-lamp即逆转录和loop-mediated isothermal amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增rna。lamp是2000年才出现的一种新颖的等温---扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的dna聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特---和检测范围等指标上能---甚至优于rt-pcr技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、---、---等病原体的快速检测。

恒温快速扩增试剂盒常用酶原料

尿dna糖基化酶尿dna糖基化酶(udg酶)又称尿-n-糖基化酶(ung酶)，可水解含尿的单链和双链dna释放出游离尿，而对rna无活性，与dutp搭配使用，可建立成pcr防污染体系。其原理如下：在pcr体系---dttp部分或全部替换为dutp后，使得反应生成含有du碱基的扩增产物，这些扩增产物不同于天然模板，在进入含有udg酶的反应体系时，可被udg酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的n-糖基键，而经切割后的dna链在碱性或高温条件下易于断裂降解，从而失去被当作模板再扩增的能力，因此可防止扩增子污染（如下图）。市面上的udg酶主要有普通型和热敏型，其中热敏型udg酶在室温条件下即可催化反应，50℃以上加热可使其灭活，防止其降解后续pcr形成的含du扩增产物。虽然udg/dutp体系具有防污染功能，但在实际测试中还得---pcr的效率和灵敏度。一方面需---pcr扩增产物掺入足够量的尿碱基，从而可被udg有效切割；另一方面也需要---反应体系添加的dutp不会明显影响pcr效率，因此dttp和dutp的佳比例需通过优化确定。

恒温扩增试剂盒设计及储存

荧光探针设计:

在上下游引物中间,设计- -段长度为46-52nt与目的片段互补的序列作为荧光探针;

探针序列不与特---引物识别位点重叠,长度为46-52 nt ,序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。

试剂盒储存:

运输条件:低温运输;

储存条件:储存温度≤-20°c ,避光保存,避免重压、反复冻融:

产品有效期: 12个月。