rpa技术的基本原理

rpa技术主要依赖于三种酶：能结合单链---(寡核苷酸引物)的重组酶、单链dna结合蛋白(ssb)和链置换dna聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，反应温度在37°c左右。

重组酶与引物结合形成的蛋白-dna复合物，能在双链dna中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动dna合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的dna链与ssb结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。rpa扩增的基础体系(twistamp? basic)含有dna扩增所需的所有试剂，我们只要准备好引物和模板就行。扩增结果可以通过凝胶电泳进行终点检测，产物纯化后可用于下游研究。

在这个基础体系中添入不同的酶和探针，就可以实现多样化的rpa应用。举例来说，twistamp? exo结合了的exo探针技术和---外切酶iii，能实现数据的实时读取，就像荧光定量pcr一样。不过反应终点的扩增子总量有所减少，适合获得强荧光信号进行动力学分析，不适合终点检测(比如跑胶)。将exo探针技术、---外切酶iii和逆转录酶结合起来，可以一步实现rna模板的实时扩增。

twistdx试剂盒

目前常见的检测有---和检测。前者通过扩增---样本中的------，直接判定---的存在与否。而后者则是通过的存在，来间接推断出是否---。所以从检测的性质来看，就已不难理解其准确性会---低于---。---对于还没来得及形成的早期者以及---康复的---而言，检测的结果一般都不太---。因此，检测并不能用于诊断---，主要用于协助---诊断。

蛋白质检测的原理很简单，就是抗原结合。一个更常用的例子就是验孕棒。快筛基本都是用的这个，如果你了，显然你就应该会有---特---的蛋白质，你的身体也会针对这种---产生（的本质也是蛋白质），蛋白质检测就是利用这点，检测这些蛋白质是否存在。有些检验的是---，有些检验的是鼻腔之类的不一而足，但总的来说抗原结合是非常快的，理论上数分钟到数十分钟内就可以看到结果。

---的是，rpa 的技术增强了实验室外高度可访问和灵敏的---扩增，甚至是自我测试。在这里，我们回顾了 rpa 在其个十年发展过程中的无需设备的简单性。我们的综述包括 rpa 技术的关键知识，例如其反应成分、机制、灵敏度和特---以及的检测方法。该综述还提供了开发 rpa 分析的专有技术，以及有关市售 rpa 反应试剂盒和附件的信息。