恒温扩增试剂盒

本试剂盒可以用于rt-lamp等温扩增,rt-lamp即逆转录和loop-mediated isothermal amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增rna。lamp是2000年才出现的一种新颖的等温---扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的dna聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特---和检测范围等指标上能---甚至优于rt-pcr技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、---、---等病原体的快速检测。

恒温扩增常用酶

恒温扩增的方法多种多样，其对应的酶体系也各有差别，且一般为多酶体系，在酶原料选择上相比pcr复杂，下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。

lamp相关酶环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, lamp)所用酶主要为具有链置换功能的dna聚合酶，详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为bst dna聚合酶，用于dna链合成，同时具有链置换功能；若检测模板为rna，则可加入逆转录酶配制成rt-lamp反应体系。

恒温扩增试剂盒操作步骤

提前30分钟将试剂盒所需组分取出,室温融化。鹿荡混匀。

1).每个干粉反应管加入29.4 ul abuffer (注意: abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产“生影响) ; 1.每个干粉反应管加入29.4 ulabuffer (注意: abuffer需完全融化混匀,否则会对实验效果产生影响) ;

2.每个反应管分别加入2 ul上游引物、2 ul下游引物和0.6 μ探针(引物和探针浓度为10 μm ,对于多个反应、步骤1和步骤2可以混合后再分装至反应管中)