发布单位:北京立博泰业科技有限公司 发布时间:2022-5-11
核算释放剂产品特点
1.单溶液,操作简单,只用一步(约5-10分钟)即可以得到用于---扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的chelex100提取方法快。
2.可用于dna模板。
3.跟各种后续实验兼容,包括pcr、lamp等。
1.将约2μl液体样品(如全血、细胞培养液、---样品、粪便样品)或2mg(约半粒芝麻大小)的固体样品(如动物组织、植物叶片、种子等)加入到50μl本产品中。
注意:样品加入量可能需要根据其dna的含量稍做调节,如果样品dna含量少,则用量要增加,但总液体样品用量尽量不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量尽量不要超过1mg/10μl的比例。
2.对液体样品,室温放置3分钟;对固定样品80℃加热5分钟;对难以的样品(如有厚壁的---、石蜡组织切片、血斑),则保温时间可以延长到10-30分钟。
3.简短振荡混匀后取样品裂解液直接进行pcr扩增或其他扩增(裂解物体积尽量不要超过反应体积的2/5,对50μl体系的扩增,加入的裂解液尽量不要超过20μl。由于各扩增体系成分不同,头次跟本产品组合时尽量做梯度测试,即在50μl的扩增反应中分别加5μl、10μl、15μl、20μl、25μl样品裂解液进行测试)。
4.其余同常规操作。
---释放剂可以裂解细胞或---蛋白质外壳,将其中的---释放出来,再通过pcr实验进行---。它有不同的类型,其中灭活型---保存液
有些地方做---比较多,也直接把这种灭活型---保存液称为---释放剂,它---的特点是能快速灭活---,将---蛋白膜衣壳降解掉,
裂解---的方式有很多种:
1.加热法:通常需要加热80到100摄氏度加热5-10分钟,操作很简单,只用一步即可以得到用于---pcr扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步
骤,比常用的chelex100提取方法和/方法快。这种方法虽然简单快速,但是提取的---含量较少。
2.浓盐法:高浓度的盐可以破坏---与蛋白质之间的次级键,使---白解联,使------释放出来。通常使用---胍、异---胍或非胍盐裂解盐,
可以直接裂解灭活---,不需要加热处理样本,简便快速。